卵巢癌为妇科肿瘤之一,早期症状不明显,晚期发现时致死率增加。其中部分的病人接受周期性化学治疗后,仍会复发甚至出现药物抗性,增加了治愈的困难度。
本研究以卵巢癌为研究对象,从牛樟芝子实体乙醇萃取物(TCCE)中筛选出能抑制卵巢癌细胞株PA-1、OVCAR-3 生长的特定有效成分,进而探讨其作用机制。
结果显示 TCCE 具有抑制PA-1与OVCAR-3生长的能力,从TCCE分离的fraction中以fraction K4 (FK4) 抑制效果最好,再将FK4中主要成分纯化,得到K4-2,对PA-1与OVCAR-3明显抑制生长,IC50分别为 8.4μg/ml、17.2μg/ml。K4-2 分别以浓度 (2.5~15μg/ml、5~20μg/ml) 处理 PA-1、OVCAR-3 细胞24与48小时,可以观察细胞皱缩、漂起、细胞周期subG1 phase的产生、以及细胞膜内侧磷脂丝胺酸外翻,证实K4-2会诱导细胞凋亡。
透过RT-PCR观察death receptor的mRNA表现,显示K4-2会诱导TRAIL讯息传递路径的 DR4、DR5的表现,再以western blot观察TRAIL讯息传递路径的蛋白表现,结果显示K4-2会使TRAIL与DR4、DR5活化,并活化下游的caspase 8蛋白,粒线体上的Bcl-2表现下降,使粒线体膜电位改变释出cytochorome C 接着活化caspase 3,进而切割核内poly (ADP-ribose) polymerase,抑制DNA的修复,使细胞走向凋亡。这些结果证实K4-2会透过TRAIL的讯息传递路径诱导细胞凋亡。
(转载国际临床医学)